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详情描述

【摘要】 目的探讨金线莲乙酸乙酯提取物的降血糖作用及其机制。方法 将正常和糖尿 病小鼠随机分为 5 组,14 d 后,测定各实验组小鼠肝糖原、血糖等指标。结果 金线莲乙酸 乙酯提取物能显著降低糖尿病小鼠的血糖,使糖尿病小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活 性升高,丙二醛(MDA)、三酰甘油 (TG)、总胆固醇(TC)的含量显著降低,小鼠肝糖原含 量明显增加。结论 金线莲乙酸乙酯提取物有降血糖作用,其降糖机制可能与其调节血脂水 平、增加外周组织对葡萄糖的利用及提高糖尿病小鼠的抗氧化能力有关。


金线莲是我国传统中药,常用于治疗糖尿病、关节炎等疾病。金线莲具有低毒的特 点同时又含有多种氨基酸,民间有药食同源的悠久历史,因而金线莲有很好的开发应用 前景。


有学者对金线莲做过初步研究,认为其降糖作用的有效成分主要存在于金线莲的大极 性组分中即水溶性成分,而中等极性及低极性组分无降糖作用 。此外,关于金线莲的降 血糖作用机制的研究还有待深入。


本课题组对金线莲做了系统研究,分离出金线莲的大、中、小极性成分,对其成分 进行活性研究并对其作用机制做深入探讨。


本文总结了金线莲的中等极性成分的降糖作用及 机制,为进一步从金线莲中等极性成分中分离有效成分提供实验依据。


1.1 材料与仪器


金线莲,植物标本由福建中医学院中药鉴定室杨成梓教授 鉴定, 金线莲乙酸乙酯提取物由兰州大学功能有机分子化学国家重点实验室提取并提供; 盐 酸 二 甲 双 胍 片 为 深 圳 市 中 联 制 药 有 限 公 司 产 品 ( 批 链 脲 佐 菌素; 为 Sigma 公司产品;血糖、肝糖原、超氧化物歧化酶(SOD)活性升 高,丙二醛酰甘油 (TG)、总胆固醇(TC)试剂盒购自南京建成生物工程研究 所;其余均为市售分析纯试剂。


实验动物为昆明种清洁级小鼠,雄性,体质量(252)g,由福州海王福药制药有限 公司提供。许可证SCXK(闽 紫外分光光度计 (上海精密科学仪器有限公司) ;TDL 60B 台式离心机 (上海 安亭科学仪器厂);BS124S 分析天平 (北京赛多利斯仪器系统有限公司 数显恒温 水浴锅(常州市国立试验设备研究所);XH C 旋涡混合器(常州市国立试验设备研究所)。

1.2 链尿佐菌素(STZ)糖尿病小鼠模型的建立及分组建模按文献。小鼠禁食 12 h 后按 用 0.1 molL-1,pH 4.5 柠 檬酸缓冲液配制为 的溶液),72 h 后,测定小鼠空腹血糖,选取血糖值大于 11.1 mmolL-1 小鼠作为糖尿病模型小鼠。


将正常小鼠和 STZ 诱导成功的糖尿病小鼠随机分为正常对照组、模型组、二甲双胍 组( 、金线莲乙酸乙酯提取物高、低剂量组( 。正 常组与模型组小鼠 ig 生理盐水,每天记录小鼠质量。实验连续 14 d,末次给药 2 h 后取血, 分离血清检测血糖、血脂及抗氧化指标,并检测小鼠肝糖原含量。加


1.3 统计学处理实验结果以(s)表示,进行组间 t 检验,以 为差异有显著性。

2 结 果 2.1 对小鼠体质量的影响 实验开始时各组小鼠的体质量无明显差异,正常组小鼠的体质量随实验时间的延长而增 加,模型组小鼠与正常组小鼠质量相比明显减轻各给药组小鼠与模型组比较, 体质量无明显差异(表 1) 。


广东药学院学报,第 5 期 刘青,等.金线莲乙酸乙酯 提取物降血糖作用的研究表 1 各组小鼠体质量 2.2 对小鼠血糖的影响 实验开始时,正常对照组小鼠的血糖与模型组相比差异显著(Plt0.01),模型组小鼠血 糖明显升高,表明糖尿病模型建立成功。14 d 后,金线莲乙酸乙酯提取物组小鼠血糖与模型 组相比明显降低见表 2。

表 2金线莲提取物对小鼠血糖的影响 2.3 对小鼠血脂的影响 由表 3 可见,模型组小鼠血清中 TC 和 TG 含量明显高于正常组给予药物 治疗后,二甲双胍组及金线莲乙酸乙酯提取物组小鼠血清中 TC、TG 值有下降趋势,其中 金线莲乙酸乙酯提取物高剂量的作用较强。提示金线莲乙酸乙酯提取物对糖尿病小鼠血脂有 调节作用。表 3金线莲提取物对小鼠血脂的影响 2.4 对小鼠抗氧化作用的影响 模型组小鼠血清中 SOD 活性与正常组相比明显降低 含量则明显升高 (Plt0.01),表明糖尿病模型小鼠的抗氧化能力明显弱于正常小鼠。而二甲双胍组及金线 莲乙酸乙酯提取物组小鼠的 有恢复趋势,其中二甲双胍组、金线莲乙酸乙酯提 取物高剂量组能够显著升高 SOD 活性,降低 MDA 含量,与模型组比较差异有显著性。表 明金线莲乙酸乙酯提取物能增强糖尿病小鼠的抗氧化能力(表 4) 。表 4金线莲提取物对小 鼠抗氧化指标的影响


2.5 对小鼠肝脏糖原含量的影响 由表 5 所示,模型组小鼠肝糖原含量与正常组相比显著减少甲双胍组 及金线莲乙酸乙酯提取物组小鼠肝糖原含量与模型组比差异显著

提示金线莲乙酸乙酯提取物有增强糖尿病小鼠肝糖原含量的作用。

表 5金线莲提取物对小 鼠肝糖原含量的影响 3 讨 论 注射 STZ 后,小鼠体质量逐渐减轻,血糖值与正常组小鼠相比显著升高,说明糖尿 病小鼠模型是成功的。给予金线莲乙酸乙酯提取物 14 d 后,小鼠血糖明显下降,提示金线 莲乙酸乙酯提取物有降血糖作用。


肝脏是糖代谢的主要器官,通过促进糖原合成、葡萄糖利用及抑制糖异生等途径使 血糖降低。糖尿病小鼠体内胰岛素水平下降时,肝脏糖代谢出现紊乱,糖原合成降低,葡萄 糖利用减少,糖异生加强,血糖升高。金线莲乙酸乙酯提取物能明显提高肝糖原的含量,改 善糖尿病小鼠糖代谢紊乱,促进肝糖原的合成,从而降低血糖。加


脂代谢紊乱是糖尿病发病中的重要方面,糖尿病时机体内的脂肪合成减少,分解速。脂质代谢紊乱引起血脂增高,甚至导致大血管和小血管动脉硬化,临床出现高脂血症、 脂肪肝、高血压等并发症。此外,过度增加脂肪分解,就会产生酮体,酮体超过机体的利用 限度,就会诱发酮血症及酮尿症。本实验表明,金线莲乙酸乙酯提取物对糖尿病小鼠血清中 三酰甘油、血清胆固醇的异常升高具有缓解作用,能有效降低小鼠血脂水平。加


近年来发现糖尿病及其并发症的发生与机体的氧化应激增加有关,抗氧化剂用于糖 尿病的治疗已经开始起步5,6,糖尿病患者体内存在糖的多种代谢产物,常导致机体自 由基过量生成,而引起胰岛 细胞被破坏,分泌胰岛素能力下降。SOD 是机体主要的抗氧 化酶,可清除细胞中的超氧阴离子自由基,而 MDA 是脂质过氧化物的终产物,能反映细 胞损伤的程度。本实验中,金线莲乙酸乙酯提取物能提高小鼠血清 SOD 活力,降低 MDA 含量,提高糖尿病小鼠体内抗氧化水平,提示可能与改善 细胞的功能而降低血糖有关。本实验中的乙酸乙酯部分含有金线莲植物的中等极性成分的提取物,如甾醇、三萜、 甙类等,实验结果表明有较好的降糖作用,此结果与文献3报道的的实验结果不同。丙 酮提取物与乙酸乙酯提取物,两者的有效成分是否存在差异,本课题还在进一步研究中。本 实验结果为进一步从乙酸乙酯成分中分离有效成分提供了实验依据。加